Consiste en determinar la capacidad de un microorganismo de producir un metabolito neutro: acetoína, como producto intermediario derivado del metabolismo de la glucosa.
En presencia de oxígeno atmosférico y álcali, la acetoína es oxidada a diacetilo, que es el sustrato que generará un compuesto coloreado al añadirle los reactivos adecuados.

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